Дональд Маккинли Гловер-младший родился на военно-воздушной базе Эдвардс в Эдвардсе, штат Калифорния, 25 сентября 1983 года и вырос в Стоун-Маунтин, штат Джорджия, где служил его отец. Его мать, Беверли (урождённая Смит), — бывшая воспитательница детского сада. Его отец, Дональд Гловер-старший, работал почтовым служащим. В течение 14 лет его родители были приёмными родителями, воспитывая детей из системы опеки. Гловер вырос в семье свидетелей Иеговы, однако позже перестал быть религиозным. У него есть младший брат Стивен, который стал сценаристом и продюсером и сотрудничает с ним, а также сестра по имени Брианна.
Гловер посещал среднюю школу Эйвондейл и школу искусств Декалб, и в своём школьном ежегоднике был признан «Наиболее вероятным сценаристом для Симпсонов». В 2006 году он окончил школу искусств Тиш при Нью-Йоркском университете по специальности «Драматическое письмо». Находясь в Тиш, он самостоятельно спродюсировал независимый микстейп «The Younger I Get», который так и не был выпущен. Он начал диджействовать и продюсировать электронную музыку под псевдонимом MC DJ (позже как mcDJ), сделав ремикс на альбом Суфьяна Стивенса «Illinois» (2005).
