Дональд Маккинли Гловер-младший родился на военно-воздушной базе Эдвардс в Эдвардсе, штат Калифорния, 25 сентября 1983 года и вырос в Стоун-Маунтин, штат Джорджия, где служил его отец. Его мать, Беверли (урожденная Смит), работает в детском саду на пенсии, а его отец, Дональд Гловер-старший, был почтовым работником. Его родители служили приёмными родителями в течение 14 лет. Гловер был воспитан как свидетель Иеговы, но он больше не религиозен. Его младший брат, Стивен, позже станет сценаристом и продюсером, который сотрудничает с ним. У него есть сестра по имени Брианна.
Гловер посещал среднюю школу Эйвондейл и школу искусств Декалб, и в своем школьном ежегоднике был признан «Наиболее вероятным сценаристом для Симпсонов». В 2006 году он окончил школу искусств Тиш при Нью-Йоркском университете по специальности «Драматическое письмо». Находясь в Тиш, он самостоятельно спродюсировал независимый микстейп «The Younger I Get», который не был выпущен и был отвергнут Гловером за «слишком грубый бред» того, кого он называет «дряхлым Дрейком». Он начал диджействовать и продюсировать электронную музыку под псевдонимом MC DJ (позже как mcDJ), сделав ремикс на альбом Суфьяна Стивенса «Illinois» (2005).