Татьяна Маслани родилась 22 сентября 1985 года в Реджайне, Саскачеван, Канада. Её отец Дэн Маслани — плотник, а мать Ренате Маслани, переводчик. У неё есть два младших брата, Дэниел и Майкл. Маслани имеет австрийские, немецкие, польские, румынские и украинские корни. В начальной школе Татьяна изучала французский язык, затем мама занималась с ней немецким. Бабушка и дедушка Татьяны говорили по-немецки. Уже после Татьяна приступила к изучению английского. Она также немного говорит по-испански.
С детства Татьяна занималась танцами и играла в школьном театре. В 2003 году окончила среднюю школу Dr. Martin LeBoldus High School, где принимала участие во многих театральных постановках. После окончания школы она провела некоторое время в путешествиях, прежде чем поселиться в Торонто, Онтарио в возрасте 20 лет.
Маслани — бывшая участница командных театральных игр Canadian Improv Games.